Zema ātruma centrifūga

A zema ātruma centrifūgagriešanās, lai izveidotu centrbēdzes spēku, kas atšķir dažādu blīvumu komponentus paraugā. Šūnu atdalīšanas laikā šūnas, šūnu fragmenti un citas biomolekulas tiek sadalītas dažādās vietās ar centrbēdzes spēku atkarībā no to masas un blīvuma. Konkrēti, kad parauga cauruli pagrieza ar lielu ātrumu centrifūgas rotora iekšpusē, centrbēdzes spēks dažādiem maisījuma sastāvdaļām ir proporcionāls to masai, un to ietekmē arī griešanās ātrums un rādiuss. Lielākas šūnas vai daļiņas tiek mestas uz centrifūgas caurules dibenu, bet mazākas sastāvdaļas paliek augšējā slānī. Šis atdalīšanas princips, pamatojoties uz blīvumu un masu, padara zemu ātruma centrifūgas par ideālu instrumentu šūnu atdalīšanai.

● Pareizā centrbēdzes ātruma un laika izvēle: Ātruma un laika izvēle ir būtiska šūnu atdalīšanas efektivitātei. Pārāk augsts rotācijas ātrums var izraisīt šūnu plīsumu vai bojājumus, savukārt pārāk ilgs laiks var izraisīt šūnu agregāciju vai nepilnīgus nokrišņus. Tāpēc centrbēdzes parametru izvēle jāņem vērā atbilstoši šūnu veidam, lielumam un blīvumam.
● Nodrošiniet paraugu bilanci: Paraugu bilance ir atslēga, lai novērstu centrifūgas vibrācijas un trokšņa radīšanu darbības laikā. Ievietojot paraugus, ir jāpārliecinās, ka paraugi visās centrifūgas mēģenēs ir vienādas vai līdzīgas masas. Ja parauga kvalitātē ir lielas atšķirības, vieglākai centrifūgas caurulei var pievienot atbilstošu buferšķīduma daudzumu vai parasto fizioloģisko šķīdumu, lai sasniegtu līdzsvaru.
● Atlasiet pareizo centrifūgas cauruli: Centrifūgas caurules kvalitāte un necaurlaidība ir arī būtiska ietekme uz šūnu atdalīšanas efektivitāti. Augstas kvalitātes centrbēdzes caurulēm ir laba blīvēšana un izturība pret koroziju, kas var efektīvi novērst paraugu noplūdi un piesārņojumu. Tajā pašā laikā centrbēdzes caurules specifikācija ir jāizvēlas arī pēc parauga tilpuma un nepieciešamā centrbēdzes spēka.
● Pievērsiet uzmanību centrifūgas uzturēšanai un uzturēšanai: Regulāri notīriet centrbēdzes kameru un centrifūgas rotoru, lai novērstu parauga atlikušo piesārņojumu. Pēc lietošanas notīriet tīru laiku pēc lietošanas, lai izvairītos no šķidruma atlikumu izraisītas korozijas. Tajā pašā laikā ir arī nepieciešams regulāri pārbaudīt strāvas vadu un spraudni un citus centrifūgas komponentus, lai pārliecinātos, ka tie ir neskarti un izvairītos no drošības apdraudējumiem.

● Šūnu ārstēšana gēnu inženierijā: Ģenētiskajā inženierijā šūnas bieži ir jākopj, jānospiež, pārmeklē un citas apstrādes metodes. Centrifūgas ar zemu ātrumu var izmantot tādos posmos kā šūnu suspensiju koncentrācija un mazgāšana, kā arī šūnu savākšana pēc transfekcijas. Centrifugējot, var noņemt piemaisījumus un netransfektētas šūnas šūnu barotnē, un var uzlabot gēnu transfekcijas efektivitāti un tīrību.
● Olbaltumvielu attīrīšana un izolācija: Olbaltumvielu pētījumos no sarežģītiem bioloģiskajiem paraugiem ir jāattīra specifiski olbaltumvielas. Zema ātruma centrifūgas var izmantot, lai sākotnēji noskaidrotu olbaltumvielu šķīdumu un piemaisījumu, piemēram, šūnu atlieku, nukleīnskābju utt., Noņemšanu, izmantojot centrbēdzes apstrādi, var iegūt salīdzinoši tīru olbaltumvielu šķīdumu, kas nodrošina pamatu turpmākajām attīrīšanas posmiem.
● Vīrusa daļiņu izolēšana un attīrīšana: Vīrusa daļiņām parasti ir noteikts blīvums un lielums, un tās var atdalīt un attīrīt ar zema ātruma centrifūgām. Piemēram, virusoloģijas pētījumos vīrusu daļiņas var atdalīt no šūnu kultūrām, izmantojot diferenciālu centrifugēšanu. Šī metode izmanto centrbēdzes spēku atšķirību priekšrocības dažādos ātrumos, lai atdalītu vīrusu daļiņas no citām šūnu komponentiem.
● Bioloģisko zāļu ražošana un kvalitātes kontrole: Bioloģisko zāļu ražošanas procesā bieži tiek izmantoti centrifūgas ar zemu ātrumu, lai noskaidrotu šūnu kultūras šķidrumu, šūnu atlieku noņemšanu un sākotnējo narkotiku produktu atdalīšanu. Turklāt, lai noteiktu galvenos rādītājus, piemēram, zāļu daļiņu, kvalitātes kontroli var izmantot arī centrifūgas ar zemu ātrumu centrifūgas.

◇ Primārā atdalīšana: Zema ātruma centrifūgas bieži izmanto vīrusa daļiņu primārajai atdalīšanai. Vīrusa ekstrakcijas procesā lielas daļiņas, piemēram, šūnu fragmentus un piemaisījumus, var noņemt, centrifugējot zemu ātrumu, un var iegūt salīdzinoši tīru vīrusa suspensiju. Šis solis atvieglo turpmākos attīrīšanas posmus.
◇ Vīrusa bagātināšana: Dažos gadījumos zema ātruma centrifūgas var izmantot arī vīrusu bagātināšanai. Pielāgojot centrifūgas laiku un ātrumu, vīrusa daļiņas var nogulsnēt centrifūgas caurules apakšā, lai koncentrētu vīrusa paraugu varētu iegūt, iegūstot supernatantu. Tomēr jāatzīmē, ka zema ātruma centrifūgu bagātināšanas efekts ir salīdzinoši ierobežots, un gadījumos, kad nepieciešami augstas tīrības līmeņa vīrusi, parasti ir vajadzīgas citas attīrīšanas metodes.

 

● Diferenciālā centrbēdzes metode: Diferenciālā centrbēdzes metode ir dažāda lieluma un blīvuma daļiņu atdalīšanas metode, izmantojot dažādus ātrumus un centrbēdzes laikus. Diferenciālo centrifugēšanu bieži izmanto, lai vēl vairāk noņemtu piemaisījumus un koncentrētu vīrusu vīrusa attīrīšanas laikā. Pēc lielu daļiņu, piemēram, organellu noņemšanas, ar nelielu ātruma centrifugēšanu vīrusa daļiņas tiek izgulsnētas ar ātrgaitas centrifugēšanu.
● Blīvuma gradienta centrifugēšanas metode: Blīvuma gradienta centrifugēšanas metode ir dažādu blīvumu barotnes izmantošana, lai veidotu gradientu, lai dažādu blīvuma daļiņas gradienta metodē norobežotos dažādās pozīcijās. Vīrusa attīrīšanā blīvuma gradienta centrifugēšanu bieži izmanto, lai atdalītu vīrusa daļiņas no citiem līdzīga blīvuma piemaisījumiem (piemēram, olbaltumvielām, nukleīnskābēm utt.). Sagatavojot blīvuma gradientu iepriekš centrifūgas mēģenē un pēc tam pievienojot vīrusa suspensiju uz gradienta virsmas centrifugēšanai, vīrusa daļiņas nokārtosies noteiktā stāvoklī gradientā, veidojot sedimentācijas zonu.
● Nokrišņu metode: Nokrišņu metode ir vīrusa daļiņu nogulsnes, pievienojot ķīmiskos reaģentus. Parastie nogulsnējošie līdzekļi ietver amonija sulfātu, polietilēnglikolu (PEG) utt. Nokrišņu metodi var izmantot vīrusa turpmākai attīrīšanai. Pielāgojot nogulsnes koncentrāciju un pH vērtību, vīrusa daļiņas var selektīvi izgulsnēties, lai noņemtu piemaisījumus.
● Filtrēšanas metode: Filtrēšanas metode ir metode vīrusa daļiņu atdalīšanai no citiem piemaisījumiem ar gēla filtrācijas hromatogrāfijas kolonnu. Gēla filtra hromatogrāfijas kolonna tiek atdalīta pēc daļiņu lieluma, un lielās molekulas vispirms izplūst no hromatogrāfijas kolonnas, un mazās molekulas izplūst vēlāk. Izvēloties piemērotus gēlus un hromatogrāfiskus apstākļus, vīrusa daļiņas var efektīvi atdalīt no citiem piemaisījumiem.
● Elektroforētiskā metode: Elektroforētiskā metode ir elektriskā lauka darbības izmantošana, lai izgatavotu lādētas daļiņas elektriskā lauka migrācijas metodē. Vīrusa attīrīšanā elektroforēzi bieži izmanto, lai atdalītu vīrusu daļiņas no citiem uzlādētiem piemaisījumiem. Efektīvu vīrusa daļiņu atdalīšanu un attīrīšanu var panākt, izvēloties piemērotus elektroforēzes apstākļus un barotni.

Populāri tagi: Zema ātruma centrifūga, Ķīna maza ātruma centrifūgu ražotāji, piegādātāji, rūpnīca