Uzziniet par laboratorijas hromatogrāfijas kolonnām

Līdzhromatogrāfijas kolonnaAtdalīšanas paņēmiens ir balstīts uz dažādiem nodalījuma koeficientiem starp fiksēto fāzi un mobilo fāzi maisījumā. Stacionārā fāze parasti ir adsorbents, piemēram, silikagela, alumīnija oksīds, poliamīds utt., Kas ir vienmērīgi piepildīta hromatogrāfijas kolonnā. Mobilā fāze ir šķīdinātājs, kas ienes maisījumu hromatogrāfijas kolonnā, kas pazīstams arī kā eluents. Tā kā mobilā fāze pārvietojas hromatogrāfijas kolonnā, katrs komponents paliek fiksētā fāzē dažādiem laikiem, ņemot vērā nodalījuma koeficienta starpību, lai panāktu atdalīšanu.

Kā svarīgs atdalīšanas rīks laboratorijas hromatogrāfijas kolonnai ir būtiska loma ķīmiskajās, bioloģiskajās, farmaceitiskajās un citās jomās. Balstoties uz hromatogrāfijas principu, katra komponenta atdalīšanu maisījumā var efektīvi realizēt, izmantojot starpsienas koeficienta, adsorbcijas spējas un dažādu vielu šķīdības atšķirību starp fiksēto fāzi un mobilo fāzi. Šis dokuments sīki iepazīstinās ar pamatprincipu, veidu, atlases metodi, darbības procedūru un pielietojumu dažādās laboratorijas hromatogrāfijas kolonnas jomās.

Laboratorijas hromatogrāfijas kolonnas var iedalīt daudzos veidos atbilstoši to darbības principam, piepildīšanas materiālam, formai un lielumam.

◆ Klasifikācija pēc darbības principa

1) Adsorbcijas kolonnas hromatogrāfija: adsorbentu izmanto, lai atdalītu katra maisījuma komponenta adsorbcijas spējas atšķirības. Adsorbenta izvēle ir atkarīga no atdalāmās vielas rakstura, piemēram, silikagela, ir piemērota nepolāro un polāro savienojumu atdalīšanai, un alumīnija oksīds ir piemērots dažāda veida savienojumiem atbilstoši skābei un sārmiem.

2) Nodalījuma kolonnas hromatogrāfija: maisījums tiek atdalīts pēc atšķirības starp nodalījuma koeficientu starp fiksētajām un mobilajām fāzēm. Sadalījuma kolonnas hromatogrāfija parasti izmanto šķīdinātāja sistēmu kā mobilo fāzi un pielāgo nodalījuma koeficientu, mainot šķīdinātāja sastāvu.

3) Jonu apmaiņas kolonnas hromatogrāfija: Selektīvo adsorbciju un jonu izdalīšanos maisījumā atdala ar jonu apmaiņas sveķiem. Jonu apmaiņas sveķiem ir īpašas jonu apmaiņas grupas, kas var apmainīties ar joniem atdalītā vielā.

◆ kārtot, aizpildot materiālu

1) silikagela kolonna: silīcija dioksīda gēls ir parasti lietots adsorbents, kas piemērots dažādu organisko vielu atdalīšanai. Silikona kolonnām ir lieliska termiskā un ķīmiskā stabilitāte, un tās var izmantot plašā pH diapazonā.

2) Alumīnija oksīda kolonna: alumīnija oksīda kolonna ir sadalīta skābā, sārmainajā un neitrālā alumīnija oksīda kolonnā atbilstoši skābei un sārmiem, kas piemērota dažāda veida savienojumiem. Alumīnija oksīda kolonnai ir spēcīga polāro vielu adsorbcijas spēja.

3) poliamīda kolonna: poliamīda kolonnai ir adsorbcijas hromatogrāfijas un sadalīšanas hromatogrāfijas funkcija, un tā ir piemērota savienojumu atdalīšanai, kas var veidot ūdeņraža saites ar poliamīdu, piemēram, fenoli, skābes, hinones utt.

◆ kārtot pēc formas un izmēra

1) Stikla kolonna: hromatogrāfijas kolonnas tips, ko parasti izmanto laboratorijās, ar caurspīdīguma priekšrocībām un ērtu novērošanu. Stikla kolonnas lielumu nosaka pēc atdalāmā materiāla daudzuma un atdalīšanas grūtības pakāpes, un diametra un augstuma attiecība parasti ir no 1: 8 līdz 1:50.

2) Nerūsējošā tērauda kolonna: nerūsējošā tērauda kolonnai ir korozijas pretestības un spiediena izturības priekšrocības, kas ir piemērota augstspiediena hromatogrāfijas sistēmām. Nerūsējošā tērauda kolonnu izmantošana ir salīdzinoši reti sastopama, taču tai ir priekšrocības noteiktos apstākļos.

Lai panāktu efektīvu atdalīšanu, ir ļoti svarīgi izvēlēties piemērotu hromatogrāfisko kolonnu. Izvēloties hromatogrāfijas kolonnas, jāņem vērā šādi faktori:

Laboratorijas hromatogrāfijas kolonnām ir plašs pielietojumu klāsts vairākās jomās, ieskaitot, bet ne tikai, šādi:

◆ Olbaltumvielu atdalīšana un attīrīšana: Hromatogrāfiskā kolonna ir viens no svarīgiem olbaltumvielu atdalīšanas un attīrīšanas rīkiem. Saskaņā ar olbaltumvielu lieluma, lādiņa īpašības un afinitātes atšķirību atdalīšanai un attīrīšanai var izvēlēties dažādas hromatogrāfijas metodes. Piemēram, jonu apmaiņas kolonnas hromatogrāfija ir piemērota olbaltumvielām, kas atdalītas ar lādiņa īpašībām; Affinity kolonnas hromatogrāfijā tiek izmantotas īpašas saistīšanas īpašības, lai izolētu un attīrītu mērķa olbaltumvielas.

◆ Nukleīnskābju atdalīšana: Hromatogrāfijas kolonnas var izmantot arī nukleīnskābju atdalīšanai. Izmantojot specifiskas hromatogrāfijas metodes, dažādu garumu un struktūru (piemēram, DNS fragmentu un RNS molekulu) nukleīnskābju molekulas var efektīvi atdalīt kolonnā, lai apmierinātu turpmākās nukleīnskābes analīzes, secības un citu eksperimentu vajadzības.

◆ Mazu molekulu savienojumu atdalīšana: Narkotiku starpproduktus, mazu molekulu komponentus dabiskos produktos utt., Var atdalīt ar hromatogrāfijas kolonnu palīdzību. Saskaņā ar nodalījuma koeficienta starpību starp fiksēto fāzi un mobilo fāzi mazu molekulu savienojumu atdalīšanai un attīrīšanai var izvēlēties piemērotu hromatogrāfijas metodi. Piemēram, apgrieztās fāzes silikagela ir piemērota lipofīlu mazu molekulu atdalīšanai; Parastais silīcija gēls ir piemērots hidrofilu mazu molekulu atdalīšanai.

◆ Polisaharīdu frakcionēta atdalīšana: Hromatogrāfijas kolonnu var izmantot polisaharīdu frakcionētai atdalīšanai. Saskaņā ar polisaharīdu molekulu un sazarotās ķēdes struktūras lielumu var izvēlēties piemērotas hromatogrāfijas metodes, lai sadalītu polisaharīdu maisījumus dažādos līmeņos, kas ir noderīgi, lai turpinātu izpētīt saistību starp polisaharīdu struktūru un funkciju.

◆ Citas lietojumprogrammas: Hromatogrāfijas kolonnas tiek plaši izmantotas arī intracelulāro produktu atdalīšanā un ekstrakcijā pēc šūnu pārrāvuma, aktīvo komponentu atdalīšana un attīrīšana augu ekstraktos, antibiotiku atdalīšana un attīrīšana, fermentu atdalīšana un attīrīšana, antivielu attīrīšana, kā arī virusālu atdalīšana un koncentrācija. Turklāt hromatogrāfiskajai kolonnai ir arī liela nozīme naftas ķīmisko produktu atdalīšanā un analīzē, pārtikas piedevu atdalīšana un noteikšana, kosmētisko izejvielu atdalīšana un attīrīšana, polimēru materiālu klasifikācijas analīze un dabisko garšvielu atdalīšana un attīrīšana.