HPLC analīzes pielietošana rotācijas iztvaicētājā

Augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju (HPLC) sauc arī par augstspiediena šķidruma hromatogrāfiju, ātrgaitas šķidruma hromatogrāfiju, augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju un moderno kolonnu hromatogrāfiju. Tā ir efektīva un ātra analītiskās atdalīšanas tehnoloģija, kas strauji attīstījās 20. gadsimta 70. gados, un tā ir nozīmīgs līdzeklis mūsdienu atdalīšanas pārbaudēm.

Augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfija (HPLC) izmanto šķidrumu kā mobilo fāzi un izmanto augstspiediena infūzijas sistēmu, lai sūknētu mobilo fāzi, piemēram, vienu šķīdinātāju ar dažādu polaritāti vai sajauktu šķīdinātāju un buferšķīdumu ar dažādām proporcijām hromatogrāfijas kolonnā ar stacionāro fāzi. Pēc tam, kad kolonnas komponenti ir atdalīti, tie nonāk detektorā noteikšanai, lai veiktu parauga analīzi.

Augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfijas atdalīšanas mehānisms ir tāds pats kā parastajai kolonnu hromatogrāfijai, taču iepakojums ir smalkāks, un tas ir jāspiež ar augstspiediena sūkni, kam ir augsta kolonnas efektivitāte un ātrs analīzes ātrums. Atšķirībā no gāzu hromatogrāfijā, šķidrā hromatogrāfijā komponentu atdalīšanas procesā piedalās arī kustīgā fāze, kuras sastāvs, proporcija un pH vērtība ir elastīgi regulējama ar dažādiem atdalīšanas režīmiem. Praksē paraugu aiztures vērtība un selektivitāte hromatogrāfijas kolonnā tiek regulēta, mainot kustīgās fāzes sastāvu, lai varētu atdalīt dažādus paraugus.

 

HPLC analīzes sastāvdaļas

 

Kolonna: kolonna ir HPLC sistēmas galvenā sastāvdaļa, ko izmanto savienojumu atdalīšanai paraugā. Parastās atdalīšanas kolonnas ietver reversās fāzes kolonnu, jonu apmaiņas kolonnu, gēla filtrēšanas kolonnu utt., un to izvēle ir atkarīga no atdalāmā savienojuma īpašībām un analīzes mērķa.

Mobilā fāze: Kustīgā fāze ir šķīdinātāju kombinācija, ko izmanto HPLC, lai izvadītu paraugu caur atdalīšanas kolonnu. Kustīgā fāze parasti sastāv no šķīdinātāju maisījuma, kas var būt viens šķīdinātājs vai vairāku šķīdinātāju maisījums noteiktā proporcijā. Piemērotas plūsmas izvēle ir ļoti svarīga atdalīšanas efektam.

Sūknis: Sūkni izmanto, lai nodrošinātu mobilo fāzi un izspiestu to caur atdalīšanas kolonnu ar noteiktu spiedienu. Parastie sūkņi ietver nemainīga spiediena sūkni un gradienta sūkni. Gradienta sūknis var realizēt lineāras vai nelineāras mobilās fāzes sastāva izmaiņas, lai iegūtu labāku atdalīšanas efektu.

Inžektors: Inžektoru izmanto, lai analizējamo paraugu ievadītu HPLC sistēmā. Paraugu ņemšanas ierīce var būt manuāli darbināma šļirce vai automātiskais paraugu ņēmējs. Tiem parasti ir precīza tilpuma īpašības un laba atkārtojamība, lai nodrošinātu precīzu parauga ievadīšanu.

Kolonnu krāsns: kolonnas krāsni izmanto, lai kontrolētu atdalīšanas kolonnas temperatūru. Kontrolējot temperatūru, var mainīt sadales koeficientu un parauga atdalīšanas ātrumu kolonnā, tādējādi optimizējot atdalīšanas efektu.

Detektors: Detektoru izmanto, lai noteiktu atdalīto savienojumu un radītu elektrisku signālu, kas saistīts ar tā koncentrāciju. Parastie detektori ietver ultravioletā starojuma absorbcijas detektoru, fluorescences detektoru un elektroķīmisko detektoru. Detektora izvēle ir atkarīga no analizējamā savienojuma īpašībām un noteikšanas jutīguma prasībām.

Datu iegūšanas sistēma: Datu iegūšanas sistēma tiek izmantota, lai saņemtu, ierakstītu un analizētu detektora izvadītos signālus. Tas var konvertēt noteikto signālu tādos parametros kā maksimuma laukums un aiztures laiks, kā arī nodrošināt rezultātu analīzi un interpretāciju.

 

Pēc šķīdinātāja noņemšanas līdzrotācijas iztvaicētājs, iegūtais paraugs parasti ir koncentrēts vai ciets. Ja vēlaties turpināt analizēt vai noteikt savienojumus paraugā, varat tos analizēt ar augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju (HPLC).

Vispārīgi soļi paraugu analīzei pēc rotācijas iztvaicēšanas ar HPLC

 

1. Parauga šķīdināšana: izšķīdina paraugu pēc rotācijas iztvaicēšanas atbilstošā šķīdinātājā. Izvēloties šķīdinātājus, jāņem vērā analizējamās vielas šķīdība un HPLC analīzes apstākļu prasības.

2. Standartšķīduma sagatavošana: ja nepieciešama kvantitatīvā analīze, testējamā savienojuma standartšķīdumu var sagatavot turpmākai analīzes rezultātu korekcijai un aprēķināšanai.

3. Veikt HPLC analīzi: ievadiet paraugu HPLC sistēmā un uzstādiet atbilstošu atdalīšanas kolonnu, kustīgo fāzi un detektoru. Atbilstoši analīzes mērķim izvēlieties atbilstošas ​​metodes un parametrus, piemēram, plūsmas ātrumu, temperatūru un gradienta programmu.

4. Datu vākšana un analīze: parauga hromatogrammu savāc ar HPLC sistēmu, un mērķa savienojumu kvantitatīvi nosaka vai identificē saskaņā ar pīķa laukumu, aiztures laiku vai citiem saistītiem parametriem. Kvantitatīvās analīzes veikšanai var izmantot standarta līknes metodi un iekšējā standarta metodi.

5. Rezultātu interpretācija: Saskaņā ar analīzes rezultātiem paraugā esošie savienojumi tika kvalitatīvi un kvantitatīvi novērtēti. Atbilstoši vajadzībām varat ģenerēt atskaites vai ierakstīt analīzes rezultātus.

 

Rotovap izmantošanai HPLC analīzē ir divas praktiskas nozīmes

 

• Parauga koncentrācija: dažos gadījumos analizējamā parauga koncentrācija var būt pārāk zema, tāpēc parauga koncentrēšanai var izmantot ķīmisko rotācijas iztvaicētāju, lai palielinātu analizējamās vielas noteikšanas jutību HPLC.
• Šķīdinātāja noņemšana: Dažos paraugos šķīdinātāji var traucēt HPLC analīzi, tāpēc paraugos ir jānoņem vai jāaizstāj ar HPLC piemērotiem šķīdinātājiem. Laboratorijas rotācijas iztvaicētājs var palīdzēt noņemt šķīdinātāju un pārveidot paraugu HPLC analīzei piemērotā formā.

 

HPLC analīze unrotācijas iztvaicētājsir divas ķīmiskajā analīzē plaši izmantotas metodes, un tām ir dažas atšķirības un sakarības principā un pielietojumā.

 

Atšķirība

 

Princips: HPLC ir balstīta uz šķidruma hromatogrāfijas principu, un atdalīšana un kvantitatīvā analīze tiek veikta, mijiedarbojoties starp stacionāro fāzi (kolonnu) un kustīgo fāzi (šķīdinātāju). Iztvaicētājs izmanto sildīšanas un rotācijas principu, lai ātri iztvaicētu šķidro paraugu un noņemtu šķīdinātāju, lai koncentrētu paraugu vai mainītu parauga šķīdinātāja vidi.

Pieteikuma lauks: HPLC plaši izmanto ķīmijā, farmācijā, vidē un citās jomās, un to var izmantot savienojumu atdalīšanai, identificēšanai un kvantitatīvai analīzei sarežģītos maisījumos; Rotācijas iztvaicēšanu galvenokārt izmanto paraugu koncentrēšanas, šķīdinātāja noņemšanas un paraugu sagatavošanas procesā, un to parasti izmanto organiskajā sintēzē, dabisko produktu ekstrakcijā, paraugu sagatavošanā un citās jomās.

Analīzes ātrums: HPLC analīze parasti aizņem ilgu laiku, lai atdalītu un noteiktu paraugus, kas var ilgt no vairākām minūtēm līdz vairākām stundām; Vakuuma rotācijas iztvaicētājs var ātri iztvaikot šķidruma paraugus īsā laikā, parasti tikai dažas minūtes.

 

Savienot

 

Parauga apstrāde: Rotācijas iztvaicētāja iekārtas bieži izmanto paraugu koncentrēšanai vai šķīdinātāju noņemšanai paraugu sagatavošanas laikā, lai padarītu paraugus piemērotus turpmākām analīzes metodēm, piemēram, HPLC. HPLC analīzes efektu un precizitāti var uzlabot, koncentrējot paraugu un noņemot šķīdinātāju ar rotācijas iztvaicētāju.

Šķīdinātāja izvēle: HPLC analīzē šķīdinātāja izvēle ir ļoti svarīga atdalīšanas efektam; Therotācijas iztvaicētājsvar palīdzēt noņemt šķīdinātāju no parauga un pārveidot paraugu HPLC analīzei piemērotā formā. Tāpēc rotācijas iztvaicētājs var nodrošināt apmierinošus šķīdinātāja apstākļus HPLC analīzei.

 

Mēs piedāvājam manuālo pacelšanas rotovap un elektrisko pacelšanas rotovap, lūdzu, sazinieties ar mumssales@achievechem.comlai pielāgotu savu rotācijas iztvaicētāja mašīnu.